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PuriMag PCRbead磁性微球?qū)镻CR產(chǎn)物提取和純化而設(shè)計(jì),表面修飾大量硅羥基,能在高鹽、低pH條件下和溶液中的核酸通過疏水作用、氫鍵作用和靜電作等發(fā)生特異性結(jié)合,配合緩沖體系,可便捷回收PCR產(chǎn)物中的DNA,有效去除引物二聚體、dNTP、無機(jī)鹽及蛋白質(zhì)等雜質(zhì),整個(gè)過程操作簡單快速,15分鐘即可完成PCR產(chǎn)物的純化。本產(chǎn)品具有回收DNA片段范圍廣、操作安全簡單、回收率高,DNA純度高等特點(diǎn),非常有利于核酸的自動(dòng)化和高通量提取,回收的DNA可直接用于酶切、測(cè)序、PCR反應(yīng)等后續(xù)操作。
鄭重提示:對(duì)于一次訂購量大者,本品將提供極具競爭力的市場(chǎng)價(jià)格,實(shí)現(xiàn)最優(yōu)性價(jià)比。
■ 產(chǎn)品性能
核酸結(jié)合能力強(qiáng):比表面積>25 m2/g ,核酸結(jié)合能力>15ug DNA/mg 磁珠;
操作性能好:磁珠分散均勻,具有超順磁性,飽和磁化強(qiáng)度為70-80emu/g,磁相應(yīng)時(shí)間<30s;
穩(wěn)定性及批次間重復(fù)性好:粒徑均一,呈單分散,保證良好結(jié)果重現(xiàn)性;
保存穩(wěn)定性好:完整的氧化硅層包覆,使用性能穩(wěn)定,耐6M鹽酸酸蝕>5分鐘;
適合DNA片段范圍廣:150bp~50kb;
回收率高:回收率高達(dá)80%以上;
DNA純度高:回收的PCR產(chǎn)物純度高,A260/280=1.7~1.9,A260/230=1.9~2.3;
操作快速簡單:15分鐘即可完成整個(gè)操作流程,無需離心;
可適用于自動(dòng)化、高通量PCR產(chǎn)物純化;
■ 應(yīng)用方向
PCR產(chǎn)物純化;
本品推薦用量為PCR樣本等體積磁珠;
■ 注意事項(xiàng)
1、 磁珠保存在去離子水中,冷凍、干燥和離心可能會(huì)影響磁珠的使用效果;
2、 磁珠由于重力作用而沉降屬于正?,F(xiàn)象,在使用本產(chǎn)品前,請(qǐng)務(wù)必充分振蕩或超聲使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài);
3、 磁珠在2~8℃可穩(wěn)定保存2年。
■ 使用方法
試劑組成 PuriMag PCRbead:使用前渦旋20秒,使其徹底混勻。
Wash buffer: 可用75%乙醇替代(現(xiàn)配現(xiàn)用,4℃保存時(shí)間不超過7天);
Elution buffer: 可用純水或TE緩沖液pH8.0替代;
操作步驟:
1) 向1.5 ml的離心管或PCR管中加入待純化的PCR產(chǎn)物, 然后加入2倍樣品體積的PuriMag PCRbead,顛倒混勻數(shù)次,磁分離后吸棄上清液。
2) 向離心管中加入150 μl Wash buffer,移液槍緩慢吹打混勻,靜置1分鐘,然后將離心管放到磁力架上靜置30秒,小心吸棄上清液。重復(fù)上述步驟1次,上清液盡量移除干凈,以免影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。室溫晾干5 min,讓殘留乙醇揮發(fā)干凈,以免影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3) 向離心管中加入20~50ul的Elution buffer,移液槍緩慢吹打混勻1-2 min,將離心管放到磁力架上靜置30秒,小心將上清液吸入新離心管中,即為純化的PCR產(chǎn)物,可存放于2-8℃,長期存放需放置于-20℃。(Elution buffer在65-70℃中預(yù)熱后洗脫效果更好,減小洗脫體積或多次洗脫可增大DNA濃度)
部分客戶使用磁珠論文:
[1]田甜. 黑龍江地區(qū)特發(fā)性膜性腎病與PLA2R基因多態(tài)性的研究[D].黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院,2022.DOI:10.27126/d.cnki.ghlzy.2022.000019. [2]張志鵬. SLC26A4基因突變導(dǎo)致一個(gè)家系耳聾的研究分析[D].蘇州大學(xué),2021.DOI:10.27351/d.cnki.gszhu.2021.002300.
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