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PuriMag NGSbead磁珠專為二代測序建庫時DNA的選擇性或非選擇性回收，以及PCR產(chǎn)物的純化回收而設(shè)計。該片段分選試劑盒適用于高通量測序文庫（NGS）構(gòu)建中DNA 片段大小快速分選和回收。PuriMag NGSbead直接分散在結(jié)合緩沖液中，調(diào)整磁珠懸浮液和樣品的體積比，可以選擇左側(cè)、右側(cè)或雙側(cè)尺寸的DNA 片段。純化后的片段不含核苷酸、引物二聚體、接頭、酶和鹽等污染物。PuriMag NGSbead為新一代測序工作流程提供了高效的基于磁珠的凈化系統(tǒng)，是專門為配套自動化工作臺開發(fā)的大規(guī)模、高通量的片段分選試劑盒，可以適用于幾乎所有自動化儀器，也可人工進(jìn)行少量樣品的片段分離。
鄭重提示：對于一次訂購量大者，本品將提供極具競爭力的市場價格，實現(xiàn)最優(yōu)性價比。
■ 產(chǎn)品性能 洗脫得到的DNA純度高，A260/A280的比值在 1.7-1.9之間, A260/A230的比值通常在2.0以上。磁珠回收率高， 500bp以上回收>90%，200bp以上回收>80%，100bp以上回收>70%。
■ 應(yīng)用方向 ? 高通量測序文庫（NGS）構(gòu)建中DNA 片段大小快速分選和回收； ? 可以選擇左側(cè)、右側(cè)或雙側(cè)尺寸的DNA 片段； ? 1.8倍體積懸浮液結(jié)合后，洗滌，洗脫，可用于PCR、酶反應(yīng)產(chǎn)物的純化。
■ 注意事項 1、 磁珠保存在去離子水中，冷凍、干燥和離心可能會影響磁珠的使用效果； 2、 磁珠由于重力作用而沉降屬正常現(xiàn)象，使用前，務(wù)必充分振蕩混勻磁珠；
■ 使用方法 試劑組成
PuriMag NGSbead：使用前渦旋20秒，使其徹底混勻。 Wash buffer: 80%乙醇（現(xiàn)配現(xiàn)用，4℃保存時間不超過7天）； Elution buffer: 10 mM Tris-HCl（PH 8.0）或去離子水；
一、 第一次磁珠分選（去除不需要的大片段DNA） 1. PuriMag NGSbead磁珠室溫放置30 min，渦旋混勻至磁珠懸液顏色均一。參考表1，向反應(yīng)液中加入適量的磁珠溶液，吹打至少10 次以混勻混合液，室溫靜置5 min。
二、 第二次磁珠分選（去除不需要的小片段DNA） 1. 渦旋重懸混勻PuriMag NGSbead磁珠至顏色均一，將磁珠溶液加入上述上清中（參考表1），吹打至少10 次以混勻，室溫靜置5 min。 2. 將96 孔板放在磁力架上分離磁珠，靜置至少5 min，直至上清完全澄清。 3. 小心移棄含有不需要DNA 的上清。（注意：不要丟棄磁珠）
三、 乙醇清洗 1. 乙醇清洗步驟中，需要將96 孔板放在磁力架上，在清洗過程中勿碰觸磁珠。加入200 μL 的80%乙醇，室溫靜置至少30 s，移棄上清。重復(fù)該步驟一次。
四、 洗脫 1. 將96 孔板放在磁力架上，室溫靜置5 min，揮發(fā)殘留的乙醇。（注意：干燥至管底無明顯液滴；勿過度干燥磁珠，防止DNA 回收效率過低）。 2. 從磁力架上移走96 孔板，加入10-50 μL 的Elution buffer重懸吹打或振蕩混勻磁珠，室溫放置2-5 min。（Elution buffer在65-70℃中預(yù)熱后洗脫效果更好） 3. 將96 孔板放置在磁力架上。溶液澄清后，轉(zhuǎn)移上清至新的96 孔板中。 注意：1. 提供的操作步驟是去除小片段和大片段，獲得中間范圍內(nèi)片段的過程。若實驗?zāi)康氖侨サ粜∑位厥沾笃位蛉サ舸笃位厥招∑?，僅需選擇合適的磁珠溶液比例操作即可。 2. 該試劑盒磁珠溶液可用于300 bp~800 bp 片段的回收。 3. 由于回收獲得的片段的大小與磁珠溶液和樣品比例有關(guān)，加樣量的準(zhǔn)確性十分重要，且樣品體積盡量不要太小，減少加樣誤差，一般在50 μL~150 μL 范圍。
客戶文章：
1. Li X, Chen L, Liu T, et al. Integrated analysis of ATAC-seq and transcriptomic reveals the ScDof3-ScproC molecular module regulating the cold acclimation capacity of potato[J]. Plant Physiology and Biochemistry, 2024, 210: 108576.
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