免疫組化試劑配制之緩沖液
2019-6-11 22:21:20點(diǎn)擊：
做免疫組化實(shí)驗(yàn)時(shí)，為保證實(shí)驗(yàn)效果，組織都需要進(jìn)行洗滌，其中離不開緩沖液。下面主要介紹一些緩沖液的配制。
1、0.01M的PBS（PH7.2）液
NaCl 8g
Na2HPO4 1.15g
KH2PO4 0.2g（NaH2PO4）
加雙蒸水至1000ml
2、0.02M的TBS（PH8.2）液
Tris 4.84g
Nacl 17.5g
BSA 2.0g
NaN3 1.0g
加雙蒸水至1500ml
在攪拌下加濃HCL至PH8.2，再加雙蒸水至2000ml（BSA-牛血清白蛋白；NaN3-疊氮鈉，為防腐劑）
3、0.05M的TBS（PH7.4）液
Tris（三羥甲基胺基甲烷） 12.1g
Nacl 17.5g
加雙蒸水至1500ml
在攪拌下加濃HCL至PH7.4，再加雙蒸水至2000ml
4、0.05M的TB液（PH7.6）液
Tris 60.75g
1N HCL約420ml
加雙蒸水至1000ml
配制方法：先以少量雙蒸水（300ml）溶解Tris，加入HCL后，再用1N HCL或1N NaOH將PH值調(diào)至7.6，再加雙蒸水至1000ml。用時(shí)將0.5MTB稀釋10倍，即為0.05MTB液（PH7.6）液
1、儲(chǔ)存液
A.0.1M枸櫞酸溶液：稱取21.01g枸櫞酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸餾水中
B.0.1M枸櫞酸鈉溶液：稱取29.41g枸櫞酸鈉（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸餾水中
2、工作液
取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸餾水中，溶液pH值應(yīng)為6.0±0.1
3、PH3.5枸櫞酸鹽緩沖液
枸櫞酸2.55g
枸櫞酸鈉2.35g
雙蒸水加至100ml
4、PH6.0枸櫞酸鹽緩沖液
21.01g枸櫞酸加入蒸餾水1000ml 0.1M枸櫞酸
29.41g枸櫞酸鈉加入蒸餾水1000ml 0.1M枸櫞酸鈉
使用時(shí)取0.1M枸櫞酸9ml和0.1M枸櫞酸鈉41ml，再加入蒸餾水450ml，即配成0.01M的枸櫞酸緩沖液（PH6.0±0.1），用于微波修復(fù)抗原
先配制0.1M的醋酸和醋酸鈉溶液
0.1M醋酸液：冰醋酸5.75ml，雙蒸水加至1000ml
0.1M醋酸鈉液：醋酸鈉13.61g，雙蒸水1000ml
再配制0.1M醋酸緩沖液
0.1M醋酸210ml和0.1M醋酸鈉790ml混合即可
用時(shí)將0.1M的醋酸緩沖液稀釋5倍，即為0.05M醋酸緩沖液（PH5.2）
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