實(shí)驗(yàn)常用試劑、緩沖液的標(biāo)準(zhǔn)配制方法
1、1M Tris-HCl
□組份濃度1 MTris-HCl
（pH7.4，7.6，8.0） □配制量1L
□配置方法 1. 稱量121.1gTris置于1L燒杯中。
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br />
3.
按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。
pH值
濃HCl
7.4
約70mL
7.6
約60mL
8.0
約42mL
4. 將溶解定容至1L。
5.
高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
2、1.5 MTris-HCl □組份濃度1.5 MTris-HCl
（pH8.8）
□配制量1L
□配置方法 1.稱取181.7gTris置于1L燒杯中。
2. 加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
3. 用濃鹽酸調(diào)pH值至8.8。
4.
將溶液定容至1L。
5. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
3、10×TE Buffer □組份濃度100 mMTris-HCl，10 mMEDTA
（pH 7.4，7.6，8.0） □配制量1L
□配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L燒杯中。
1 MTris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0） 100mL
500 mMEDTA（pH8.0） 20mL
2.
向燒杯中加入約800mL的去離子水，均勻混合。
3. 將溶液定至1L后，高溫高壓滅菌。
4. 室溫保存。
4、3 M 醋酸鈉 □組份濃度3 M醋酸鈉
（pH5.2） □配制量 100mL
□配置方法 1. 稱取40.8gNaOAc?3H2O置于100～200mL燒杯中，加入約40mL的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?
2.
加入冰乙酸調(diào)節(jié)pH值至5.2。
3. 加入去離子水將溶液定容至100mL。
4.
高溫高壓滅菌后，室溫保存。
5、PBS Buffer
□組份濃度137 mMNaCl，2.7mMKCl，10 mMNa2HPO4，2 mMKH2PO4
□配制量1L
□配置方法 1. 稱量下列試劑，置于1L燒杯中。
NaCl
8 g
KCl 0.2g
Na2HPO4 1.42 g
KH2PO4 0.27g
2. 向燒杯中加入約800 mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
3. 滴加HCl將pH值調(diào)節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1L。
4. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：上述PBS Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1mMCaCl2和0.5 mMMgCl2。
6、10 M醋酸銨 □組份濃度10 M醋酸銨
□配制量 100mL
□配置方法 1. 稱量77.1g醋酸銨置于100～200 mL燒杯中，加入約30 mL的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?
2.加去離子水將溶液定容至100mL。
3.使用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。
4.密封瓶口于室溫保存。
注意：醋酸銨受熱易分解，所以不能高溫高壓滅菌。
7、Tris- HCl平衡苯酚 □配置方法
1. 使用原料：大多數(shù)市售液化苯酚是清亮無(wú)色的，無(wú)需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。但有些液化苯酚呈粉紅色或黃色，應(yīng)避免使用。同時(shí)也應(yīng)避免使用結(jié)晶苯酚，結(jié)晶苯酚必須在160℃對(duì)其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物，這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е翿NA和DNA的交聯(lián)等。因此，苯酚的質(zhì)量對(duì)DNA、RNA的提取極為重要，我們推薦使用高質(zhì)量的苯酚進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
2. 操作注意：苯酚腐蝕性極強(qiáng)，并可引起嚴(yán)重灼傷，操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，與苯酚接觸過(guò)的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗，并用肥皂和水洗滌，忌用乙醇。
3. 苯酚平衡：因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相，因此使用苯酚前必須對(duì)苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到7.8以上，苯酚平衡操作方法如下：
① 液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃，此時(shí)的苯酚呈現(xiàn)結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫，然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。
② 加入羥基喹啉（8-Quinolinol）至終濃度0.1％。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑，同時(shí)因其呈黃色。有助于方便識(shí)別有機(jī)相。
③ 加入等體積的1MTris-HCl（pH8.0），使用磁力攪拌器攪拌15分鐘，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
④ 重復(fù)操作步驟③。
⑤ 加入等體積的0.1MTris-HCl（pH8.0），使用磁力攪拌器攪拌15分鐘，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
⑥ 重復(fù)操作步驟⑤，稍微殘留部分上層水相。
⑦ 使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于7.8。
⑧ 將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
8、苯酚/氯仿/異戊醇 □配置方法
1. 說(shuō)明：從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯/酚/氯仿/異戊醇（25：24：1）。氯仿可使蛋白（25 ：24 ：1） 質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離，而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。
2. 配置方法：將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇（24：1）均勻混合后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
9、10％（W/V）SDS □組份濃度 10％（W/V）SDS
□配制量 100mL
□配置方法 1.稱量10g高純度的SDS置于100～200mL燒杯中，加入約80mL的去離子水，68℃加熱溶解。
2. 滴加數(shù)滴濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.2。
3.
將溶液定容至100mL后，室溫保存。
10、2 N NaOH
□組份濃度 2N NaOH
□配制量 100mL
□配置方法
1.量取80mL去離子水置于100～200mL塑料燒杯中（NaOH溶解過(guò)程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂）。
2. 稱取8gNaOH小心地逐漸加入到燒杯中，邊加邊攪拌。
3. 待NaOH完全溶解后，用去離子水將溶液體積定容至100mL。
4. 將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后，室溫保存。
11、2.5 N HCl □組份濃度 2.5 N HCl
□配制量 100mL
□配置方法 1. 在78.4mL的去離子水中加入21.6mL的濃鹽酸（11.6N），均勻混合。
2.
室溫保存。
12、5 M NaCl □組份濃度5 MNaCl
□配制量1L
□配置方法 1. 稱取292.2gNaCl置于1L燒杯中，加入約800mL的去離子水后攪拌溶解。
2. 加去離子水將溶液定容至1L后，適量分成小份。
3. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。
13、20％（W/V）Glucose □組份濃度 20％（W/V）Glucose
□配制量 100mL
□配置方法 1. 稱取20gGlucose置于100～200mL燒杯中，加入約80mL的去離子水后，攪拌溶解。
2. 加去離子水將溶液定容至100mL。
3.
高溫高壓滅菌后，4℃保存。
14、Solution
I □組份濃度25 mMTris-HCl（pH8.0），10mMEDTA，50mMGlucose
（質(zhì)粒提取用） □配制量1L
□配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L燒杯中。
1MTris-HCl（pH8.0）
25mL
0.5 MEDTA（pH8.0） 20mL
20％Glucose（1.11M） 45mL
dH2O
910mL
2.
高溫高壓滅菌后，4℃保存。
3.
使用前每50 mL的Soliution I中加入2mL的RNase A（20mg/mL）。
15、Solution II
□組份濃度250mMNaOH，1％（W/V）SDS
（質(zhì)粒提取用） □配制量 500mL
□配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL燒杯中。
10％SDS
50mL
2N
NaOH 50mL
2.
加滅菌水定容至500mL，充分混勻。
3.
室溫保存。此溶液保存時(shí)間最好不要超過(guò)一個(gè)月。
注意：SDS易產(chǎn)生氣泡，不要?jiǎng)×覕嚢琛?
16、Solution III
□組份濃度3MKOAc，5MCH3COOH
（質(zhì)粒提取用） □配制量 500mL
□配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL燒杯中。
KOAc 147g
CH3COOH
57.5mL
2.
加入300mL去離子水后攪拌溶解。
3. 加去離子水將溶液定容至500mL。
4.
高溫高壓滅菌后，4℃保存。
17、0.5M EDTA
□組份濃度0.5 MEDTA
(pH8.0)
□配制量1L
□配置方法 1. 稱取186.1gNa2EDTA?2H2O，置于1L燒杯中。
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢琛?
3. 用NaOH調(diào)節(jié)pH值值8.0（約20gNaOH）。
注意：pH值至8.0時(shí)，EDTA才能完全溶解。
4.
加去離子水將溶液定容至1L。
5.
適量分成小份后，高溫高壓滅菌。
6.
室溫保存。
18、1 M DTT
□組份濃度1 MDTT
□配制量 20mL
□配置方法 1. 稱取3.09gDTT，加入到50mL塑料離心管內(nèi)。
2. 加20mL的0.01 M的NaOAc（pH5.2），溶解后使用0.22μm濾器過(guò)濾除菌。
3. 適量分成小份后，-20℃保存。
19、10mM ATP
□組份濃度10mMATP
□配制量 20mL
□配置方法 1. 稱取121mg Na2ATP?3H2O，加入到50mL塑料離心管內(nèi)。
2.
加20mL的25mMTris-HCl（pH8.0），攪拌溶解。
3. 適量分成小份，-20℃保存。
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制方法
1、Ampicillin □組份濃度 100mg/ml Ampicillin
（100mg/ml）
□配制量 50mL
□配置方法 1. 稱量5gAmpicillin置于50mL離心管中。
2.
加入40mL滅菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。
4. 小份分裝（1mL/份）后，-20℃保存。
2、IPTG □組份濃度 24mg/mL IPTG
（24mg/mL）
□配制量 50mL
配置方法 1. 稱量1.2gIPTG置于50mL離心管中。
2.
加入40mL滅菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。
4.
小份分裝（1mL/份）后，-20℃保存。
3、X- Gal
□組份濃度 20mg/mL X- Gal
（20mg/mL）
□配制量 50mL
□配置方法 1. 稱取1gX-Gal置于50mL離心管中。
2. 加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 小份分裝（1mL/份）后，-20℃保存。
4、LB培養(yǎng)基 □組份濃度 1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl
□配制量1L
□配置方法 1. 稱量下列試劑，置于1L燒杯中
Tryptone 10g
Yeast
Extract 5g
NaCl 10g
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
3. 滴加5N NaOH（約0.2mL），調(diào)節(jié)pH值至7.0。
4.
高溫高壓滅菌后，4℃保存。
5、LB/Amp培養(yǎng)基 □組份濃度 1％（W/V） Tryptone
0.5％（W/V） Yeast Extract
1％（W/V） NaCl
0.1mg/mL Ampicillin
□配制量1L
□配置方法 1. 稱量下列試劑，置于1L燒杯中
Tryptone 10g
Yeast
Extract
5g
NaCl
10g
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
3.
滴加5N NaOH（約0.2mL），調(diào)節(jié)pH值至7.0。
4.
加去離子水將培養(yǎng)基定容至1L。
5. 高溫高壓滅菌后，冷卻至室溫。
6.
加入1mL Ampicillin（100mg/mL）后均勻混合。
7.4℃保存。
6、TB培養(yǎng)基
□組份濃度 1.2％（W/V） Tryptone
2.4％（W/V） Yeast Extract
0.4％（V/V）
Glycerol
17mM
KH2PO4
72mM
K2HPO4
□配制量1L
□配置方法 1. 配制磷酸鹽緩沖液（0.17MKH2PO4，0.72MK2HPO4）100mL。
2.稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tryptone 12g
Yeast
Extract
24g
Glycerol
4mL
3.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
4. 加去離子水將培養(yǎng)基定容至1L后，高溫高壓滅菌。
5.
待溶液冷卻至60℃以下時(shí)，加入100mL的上述滅菌磷酸鹽緩沖液。
6.4℃保存。
7、TB/Apm培養(yǎng)基 □組份濃度 1.2％（W/V） Tryptone
2.4％（W/V） Yeast Extract
0.4％（V/V） Glycerol
17mM
KH2PO4
72mM
K2HPO4
0.1mg/mL
Ampicillin
□配制量1L
□配置方法
1. 配制磷酸鹽緩沖液（0.17MKH2PO4，0.72MK2HPO4）100mL。溶解2.31gKH2PO4和2.54gK2HPO4于90mL的去離子水中，攪拌溶解后，加去離子水定容至100mL，高溫高壓滅菌。
2. 稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tryptone
12g
Yeast
Extract
24g
Glycerol
4mL
3. 加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
4. 加去離子水將培養(yǎng)基定容至1L后，高溫高壓滅菌。
5. 待溶液冷卻至60℃以下時(shí)，加入100mL的上述滅菌磷酸鹽緩沖液和1mL Ampicillin（100mg/mL）。
6. 均勻混合后4℃保存。
8、SOB培養(yǎng)基 □組份濃度 2％（W/V） Tryptone
0.5％（W/V） Yeast Extract
0.05％（W /V） NaCl
2.5mM KCl
10mM
MgCl2
□配制量1L
□配置方法
1. 配制250mMKCl溶液。 在90mL的去離子水中溶解1.86gKCl后，定容至100mL。
2. 配制2MMgCl2溶液。在90mL的去離子水中溶解19gMgCl2后，定容至100mL，高溫高壓滅菌。
3. 稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tryptone 20g
Yeast
Extract 5g
NaCl 0.5g
4. 加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
5 量取10mL250 mMKCl溶液，加入到燒杯中。
6. 滴加5N NaOH溶液（約0.2mL），調(diào)節(jié)pH值至7.0。
7. 加入去離子水將培養(yǎng)基定容至1L。
8. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。
9. 使用前加入5mL滅菌的2MMgCl2溶液。
9、SOC培養(yǎng)基 □組份濃度 2％（W/V） Tryptone
0.5％（W/V） Yeast
Extract
0.05％（W /V） NaCl
2.5mM
KCl
10mM
MgCl2
20mM
葡萄糖
□配制量 100mL
□配置方法
1. 配制1M葡萄糖溶液。將18g葡萄糖溶于90mL去離子水中，充分溶解后定容至100mL，用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。
2. 向100mL SOB培養(yǎng)基中加入除菌的1M葡萄糖溶液2mL，均勻混合。
3.4℃保存。
10、2×YT培養(yǎng)基 □組份濃度 1.6％（W/V）Tryptone， 1％（W/V）Yeast Extract，0.5％（W/V）NaCl
□配制量1L
□配置方法 1.稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tryptone 16g
Yeast
Extract
10g
NaCl 5g
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
3.
滴加1N KOH，調(diào)節(jié)pH值至7.0。
4.
.加水離子水將培養(yǎng)基定容至1L。
5.
高溫高壓后，4℃保存。
11、Φb×broth培養(yǎng)基 □組份濃度 2％（W/V）Tryptone， 0.5％（W/V）Yeast Extract，0.5％（W/V）MgSO4?7H2O
□配制量1L
□配置方法 1.稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tryptone 20g
Yeast
Extract 5g
MgSO4?7H2O
5g
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?nbsp;
3. 滴加1N KOH，調(diào)節(jié)pH值至7.5。
4. .加水離子水將培養(yǎng)基定容至1L。
5. 高溫高壓后，4℃保存。
12、NZCYM培養(yǎng)基 □組份濃度
0.5％（W/V） Yeast Extract
0.1％（W/V） Casamino
Acid
1％（W /V）
NZ胺
0.5％（W /V）
NaCl
0.2％（W /V）
MgSO4?7H2O
□配制量1L
□配置方法 1.稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Yeast
Extract
5g
Casamino
Acid
1g
NZ胺 10g
NaCl 5g
MgSO4?7H2O
2g
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
3.
滴加5N NaOH溶液（約0.2mL），調(diào)節(jié)pH值至7.0。
4.
.加水離子水將培養(yǎng)基定容至1L。
5.
高溫高壓后，4℃保存。
13、NZYM培養(yǎng)基 □組份濃度 0.5％（W/V） Yeast Extract
1％（W /V）
NZ胺
0.5％（W /V）
NaCl
0.2％（W /V）
MgSO4?7H2O
□配置方法 NZYM培養(yǎng)基除不含Casamino Acid（酪蛋白氨基酸）外，其他成份與NZCYM培養(yǎng)基相同。
14、NZM培養(yǎng)基 □組份濃度 1％（W /V） NZ胺
0.5％（W /V）
NaCl
0.2％（W /V）
MgSO4?7H2O
□配置方法 NZM培養(yǎng)基除不含Yeast Extract（酵母提取物）外，其他成份與NZYM培養(yǎng)基相同。
15、一般固體培養(yǎng)基的 □配置方法 1. 按照液體培養(yǎng)基配方準(zhǔn)備好液體培養(yǎng)基，在高溫高壓滅菌前，加入下列試劑中的一種。
配制 Agar（瓊脂：鋪制平板用） 15g/L
Agar（瓊脂：配制頂層瓊脂用） 7g/L
Agarose（瓊脂糖：鋪制平板用） 15 g/L
Agarose（瓊脂糖：配制頂層瓊脂用）7g/L
2.
高溫高壓滅菌后，帶上手套取出培養(yǎng)基，搖動(dòng)容器使瓊脂或瓊脂糖充分混勻（此時(shí)培養(yǎng)基溫度很高，小心燙傷）。
3.
待培養(yǎng)基冷卻至50～60℃時(shí)，加入熱不穩(wěn)定物質(zhì)（如抗生素），搖動(dòng)容器充分混勻。
4. .鋪制平板（30～35mL培養(yǎng)基/90mm培養(yǎng)皿）。
16、LB/Amp/X-Gal/IPTG □組份濃度
1％（W /V）
Tryptone
平板培養(yǎng)基 0.5％（W/V） Yeast Extract
1％（W/V）
NaCl
0.1mg/mL Ampicillin
0.5％（W /V）
IPTG
0.04mg/mL
X-Gal
1.5％（W /V）
Agar
□配制量1L
□配置方法 1. 稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tryptone 10g
Yeast
Extract
5g
NaCl 10g
2.
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
3.
滴加5N NaOH溶液（約0.2mL），調(diào)節(jié)pH值至7.0。
4.
加水離子水將培養(yǎng)基定容至1L后，加入15gAgar。
5.
高溫高壓滅菌后，冷卻至60℃左右。
6.
加入1mL Ampicillin（100mg/mL）、1mL IPTG（24mg/mL）、2mL X-Gal（20mg/mL）后均勻混合。
7.
鋪制平板（30～35mL培養(yǎng)基/90mm培養(yǎng)基）。
8.4℃保存平板。
17、TB/Amp/X-Gal/IPTG □組份濃度
1.2％（W /V）
Tryptone
平板培養(yǎng)基 2.4％（W/V）
Yeast Extract
0.4％（W/V）
Glycerol
17mM
KH2PO4
72mM
K2HPO4
0.1mg/mL
Ampicillin
0.024mg/mL
IPTG
0.04mg/mL
X-Gal
1.5％（W /V）
Agar
□配制量1L
□配置方法 1.配制磷酸鹽緩沖液（0.17MKH2PO4，0.72MK2HPO4）100mL。
2. 稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tryptone
12g
Yeast
Extract 24g
Glycerol
4mL
3. 加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?
4.
加水離子水將培養(yǎng)基定容至1L后，加入15gAgar。
5.
高溫高壓滅菌后，冷卻至60℃左右。
6.
加入100mL的上述滅菌磷酸鹽緩沖液、1mL Ampicillin（100mg/mL）、1mL IPTG（24mg/mL）、2mL X-Gal（20mg/mL）后均勻混合。
7.
鋪制平板（30～35mL培養(yǎng)基/90mm培養(yǎng)基）。
8.4℃保存平板。
生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用試劑的配制方法
1、0.5mol/L氫氧化鈉溶液 □組份濃度 0.5mol/L
□配制量 2L
□配置方法 1.準(zhǔn)確稱取氫氧化鈉40g。
2.用去離子水溶解并稀釋至2L。
2、0.5mol/L鹽酸溶液 □組份濃度
0.5mol/L
□配制量 2L
□配置方法 1.準(zhǔn)確量取鹽酸83.4mL。
2.用去離子水稀釋至2L。
4、0.2％葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 □組份濃度 0.2％
□配制量1L
□配置方法 1.稱取葡萄糖2.5g置于稱量瓶中，在70℃干燥2小時(shí)。
2.干燥器中冷卻至室溫，重復(fù)干燥，冷卻至恒重。
3.準(zhǔn)確稱取葡萄糖2.000g。
4.用去離子水溶解并定容至1L
5.于4℃保存。
5、250μg/mL牛血清
□組份濃度 250μg/mL
白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液
□配制量2L
□配置方法 1.準(zhǔn)確稱取250mg標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸緩沖液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin試劑甲
□配置方法 1.稱取10g氫氧化鈉溶于400mL去離子水中，
加入50g無(wú)水碳酸鈉，溶解，待用。
2.稱取0.5g酒石酸鉀鈉，溶于80mL去離子水中，
加入0.25g硫酸銅?5水，溶解。
3.將1：2：去離子水按20：4：1的比例混合即可。
4.4℃保存，可用一周。
7、Folin試劑乙
□配置方法
1.在500mL的磨口回流裝置內(nèi)加入鎢酸鈉?2水25.0359g，
鉬酸鈉?2水6.2526g，去離子水175mL，85％磷酸12.5mL，
濃鹽酸25mL，充分混合。
2.回流10小時(shí)，再加硫酸鋰37.5g，去離子水12.5mL及數(shù)滴溴。
3.然后開(kāi)口沸騰15min，以驅(qū)除過(guò)量的溴，冷卻后定容到250mL。
4.于棕色瓶中保存，可使用多年
注意：上述制備地Folin試劑乙地貯備液濃度一般在2mol/L左 右，幾種操作方案都是把Folin試劑乙稀釋至1mol/L的 濃度作為應(yīng)用液，我們這時(shí)是把貯備液于使用前稀釋18 倍，使之濃度為0.1mol/L略高。這種稀釋18倍后的Folin 試劑乙就是上文稱之為的“應(yīng)用液”。Folin試劑乙貯備 液濃度的標(biāo)定，一般是以酚酞為指示劑。用Folin試劑乙去滴定1mol/L左右的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液，當(dāng)溶液顏色由紅變?yōu)樽匣?，再突然變成墨綠即為終點(diǎn)，如果用氫氧化鈉去滴定Folin試劑乙，終點(diǎn)不太好掌握，溶液地顏色是由淺黃變?yōu)闇\綠，再變?yōu)榛易仙珵榻K點(diǎn)。
8、DNS試劑
□配置方法 1.取3，5-二硝基水楊酸10g,加入2mol/L氫氧化鈉溶液200mL。 （3，5-二硝基水楊酸試劑）
2.將3，5-二硝基水楊酸溶解，然后加入酒石酸鉀鈉300g。
3. 待其完全溶解，用去離子水稀釋至2000mL，棕色瓶保存。
9、5％蔗糖溶液
□組份濃度 5％
□配制量1L
□配置方法 稱取蔗糖50g，用去離子水溶解定容至1L。
10、0.1mol/L蔗糖溶液 □組份濃度 0.1mol/L
□配制量1L
□配置方法 稱取蔗糖34.230g，用去離子水溶解并定容至1L。
11、20％乙酸溶液 □組份濃度 20％
□配制量1.2L
□配置方法 量取冰乙酸300mL，用去離子水稀釋至1200mL。
12、30％（W/V）Acrylamide
□組份濃度 30％（W/V）Acrylamide 0.05％
□配制量1L
□配置方法 1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中
Acrylamide 290g
BIS
10g
2.向燒杯中加入約600mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?nbsp;
3.加入去離子水將溶液定容至1L，用0.45μm濾膜濾去雜質(zhì)。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，并可通過(guò)皮膚吸收，
其作用有積累性，配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無(wú)
毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?
13、40％（W/V）Acrylamide
□組份濃度 40％（W/V）Acrylamide 0.05％
□配制量1L
□配置方法 1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中
Acrylamide 380g
BIS 20g
2.向燒杯中加入約600mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?
3.加入去離子水將溶液定容至1L，用0.45μm濾膜濾去雜質(zhì)。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，并可通過(guò)皮膚吸收， 其作用有積累性，配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無(wú) 毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?
14、10％（W/V）過(guò)硫酸銨
□組份濃度 10％（W/V）過(guò)硫酸銨
□配制量 10mL
□配置方法 1.稱取1g過(guò)硫酸銨。
2.加入10mL的去離子水后攪拌溶解。
3.貯存于4℃。
注意：10％過(guò)硫酸胺溶液在4℃保存時(shí)間可使用2周左右，
超過(guò)期限會(huì)失去催化作用。
15、考馬斯亮藍(lán)R-250染色液
□組份濃度 0.1％（W/V）考馬斯亮藍(lán)R-250，25%（V/V）異丙醇，
10％（V/V）冰醋酸
□配制量 1L
□配置方法 1.稱取1g考馬斯亮藍(lán)R-250,置于1L燒杯中。
2.量取250mL的異丙醇加入上述燒杯中，攪拌溶解。
3.加入100mL的冰乙醋酸，均勻攪拌。
4.加入650mL的去離子水，均勻攪拌。
5.用濾紙出去顆粒物質(zhì)后，室溫保存。
16、考馬斯亮藍(lán)染色脫色液
□組份濃度 10％（V/V）醋酸，5％（V/V）乙醇
□配制量1L
□配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。
醋酸
100mL
乙醇
50mL
dH2O 850mL
2.充分混合后使用。
17、凝膠固定液
□組份濃度 50％（V/V）甲醇，10％（V/V）醋酸
(SDS-PAGE銀氨染色用) □配制量100L
□配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。
甲醇
500mL
醋酸 100mL
dH2O
400mL
2.均勻混合后室溫保存。
18、凝膠處理液
□組份濃度 50％（V/V）甲醇，10％（V/V）戊二醛
(SDS-PAGE銀氨染色用) □配制量1L
□配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。
甲醇
50mL
戊二醛
10mL
dH2O
40mL
2. 均勻混合后室溫保存。
19、凝膠染色液
□組份濃度 0.4％（W/V）硝酸銀，1％（V/V）濃氨水，
(SDS-PAGE銀氨染色用) 0.04％（W/V）氫氧化鈉
□配制量 100L
□配置方法 1.量取下列試劑，加入100～200mL試劑瓶中。
20％硝酸銀 2mL
濃氨水 1mL
4％氫氧化鈉 1mL
dH2O
96mL
2.均勻混合。該溶液應(yīng)為無(wú)色透明狀。如氨水濃度過(guò)低時(shí)溶液
會(huì)呈現(xiàn)混濁狀，此時(shí)應(yīng)補(bǔ)加濃氨水，直至透明。
3.本染色液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，不宜保存。
20、顯影液
□組份濃度 0.005％（V/V）檸檬酸，0.02％（V/V）甲醛
(SDS-PAGE銀氨染色用) □配制量1L
□配置方法 1.稱取下列試劑，置于1L試劑瓶中。
檸檬酸 50mg
甲醛 0.2mL
2.加入1L去離子水后，搖動(dòng)混合后溶解。
3.室溫保存。
21、45％乙醇溶液
□組份濃度 45％
□配制量1L
□配置方法 量取無(wú)水乙醇450mL，加入去離子水550mL，混勻。
22、5％的十二烷基硫酸鈉溶液 □組份濃度 5％
（W/V） □配制量0.1L
配置方法:稱取5.0g十二烷基硫酸鈉,溶于100mL4％的乙醇溶液中。
23、三氯甲烷-異戊醇混合試劑
配置方法 取500mL三氯甲烷試劑，加入21mL異戊醇試劑，混勻。
24、1.6％乙醛溶液
□組份濃度 1.6％
□配制量0.1L
□配置方法 取47％乙醛3.4mL，用去離子水定容至100mL。
25、二苯胺試劑
□配置方法 1.稱取二苯胺試劑0.8g，溶解于180mL冰乙酸中，
2.再加入8mL高氯酸混勻。
3.
臨用前加入0.8mL 1.6％乙醛溶液。
注意：配制完成后試劑應(yīng)為無(wú)色。
26、15％三氯乙酸溶液
□組份濃度 15％
□配制量 2L
□配置方法 稱取三氯乙酸300g，用去離子水溶解定容至2000mL。
27、1％谷氨酸溶液
□組份濃度 1％
□配制量
0.5L
□配置方法 1.稱取5g谷氨酸，先用適量得用去離子水溶解。
2. 再用氫氧化鉀溶液中和至中性。
3. 最后用去離子水定容至0.5L。
28、1％丙酮酸溶液
□組份濃度
1％
□配制量 0.5L
□配置方法 1.稱取5g丙氨酸，先用適量得用去離子水溶解。
2.
再用氫氧化鉀溶液中和至中性。
3.
最后用去離子水定容至0.5L。
29、0.1％的碳酸氫鉀溶液 □組份濃度 0.1％
□配制量 0.5L
□配置方法 稱取碳酸氫鉀0.5g，用去離子水溶解定容至0.5L。
30、0.05％的碘乙酸溶液 □組份濃度 0.05％
□配制量0.25L
□配置方法 稱取0.125g碘乙酸，用去離子水溶解定容至0.25L。
31、Locke氏溶液
□配制量2L
配置方法 稱取18g氯化鈉,0.84g氯化鉀,48g氯化鈣,0.3g碳酸
氫鈉，2g葡萄糖，用去離子水溶解定容至2000mL。
32、0.2mol/L的丁酸溶液 □組份濃度 0.2mol/L
□配制量1L
□配置方法 1.量取18mL正丁酸試劑。
2.用1mol/L的氫氧化鈉中和。
3.再用去離子水定容至1L。
33、0.1mol/L的硫代硫酸鈉溶液 □組份濃度 0.1mol/L
□配制量 10L
□配置方法 稱248.17g硫代硫酸鈉，用去離子水溶解并定至10L。
34、0.1mol/L的碘溶液 □組份濃度 0.1mol/L
□配制量1L
□配置方法 1.稱取碘12.7g和碘化鉀25g。
2.用去離子水溶解并定容至1L。
3.用0.1mol/L的硫代硫酸鈉標(biāo)定。
35、10％氫氧化鈉溶液
□組份濃度 10％
□配制量2L
□配置方法 稱取200g氫氧化鈉，用去離子水溶解并定容至2L。
36、10％鹽酸溶液
□組份濃度 10％
□配制量0.2L
□配置方法 量取濃鹽酸49.3mL，用去離子水定至0.2mL。
37、0.1％標(biāo)準(zhǔn)丙氨酸溶液 □組份濃度 0.1％
□配制量0.5L
□配置方法 稱取丙氨酸0.5g，用去離子水溶解并定容至0.5mL。
38、0.1％標(biāo)準(zhǔn)谷氨酸溶液 □組份濃度 0.1％
□配制量 0.5L
□配置方法 稱取谷氨酸0.5g，用去離子水溶解并定容至500mL。
39、0.1％水合茚三酮乙醇溶液 □組份濃度 0.1％
□配制量
1L
□配置方法 稱取1g水合茚三酮試劑，溶于1000mL無(wú)水乙醇中。
40、酚溶液
□配置方法 在大燒杯中加入80mL去離子水，再加入300g苯酚，在水 浴中加熱攪拌、混合至苯酚完全溶解。將該溶液倒入盛有200mL去離子水的1000mL分液漏斗內(nèi)，輕輕振蕩混合，使其成為乳狀液。靜止7～10小時(shí)，乳狀液變成兩層透明溶液，下層為被水飽和的酚溶液，放出下層，貯存于棕色瓶中備用。
41、0.5％淀粉溶液
□組份濃度 0.5％
□配制量
0.1L
□配置方法 稱取淀粉0.5g，用去離子水溶解定容至0.1L。
42、對(duì)羥基聯(lián)苯試劑
配置方法 稱取對(duì)羥基聯(lián)苯1.5g，溶于100mL0.5％氫氧化鈉溶液中，
配制成1.5％的溶液。若對(duì)羥基聯(lián)苯顏色較深，應(yīng)用丙酮
或 無(wú)水乙醇重結(jié)晶，放置時(shí)間較長(zhǎng)后，會(huì)出項(xiàng)針狀結(jié)晶，應(yīng)搖勻后使用。
生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用緩沖液的配制方法
1、0.2 mol/L 磷酸緩沖液 □組份濃度 0.2mol/L
（pH 6.0） □配制量1L
□配置方法 1. 稱取磷酸氫二鈉?12水8.82
g。
2.
稱取磷酸二氫鈉?2水27.34g。
3. 用去離子水溶解并定容至1L。室溫保存。
注意：此為母液，使用時(shí)稀釋40倍使用。
2、洗脫液
□組份濃度 0.15mol/L
（含0.15mol/L氯
□配制量 10L
化鈉的0.005mol/L
□配置方法 1.稱取氯化鈉87.66g。
pH 6.0的磷酸緩沖液） 2.
用0.2mol/L pH6.0的
磷酸緩沖液250mL溶解。
3.
用去離子水稀釋至10 L。室溫保存。
3、0.3mol/L磷酸緩沖液 □組份濃度 0.3mol/L
（pH7.8） □配制量 0.5L
□配置方法 1.準(zhǔn)確稱取磷酸氫二鈉?12水49.150g。
2.磷酸二氫鈉?2水2.000g。
3. 用去離子水溶解并定容至0.5L。室溫保存。
注意：此為母液，使用時(shí)稀釋10倍使用。
4、0.2mol/L乙酸緩沖液 □組份濃度 0.2mol/L
（pH4.6）
□配制量 2L
□配置方法 1.準(zhǔn)確稱取乙酸鈉?3水54.44g。
2. 加入23mL冰乙酸，溶解。
3. 用去離子水溶解并定容至2L。4℃保存。
5、0.2mol/L磷酸-檸檬酸 □組份濃度 0.2mol/L
緩沖液 □配制量 各1L
（pH 2.6、4.6、6.6）
□配置方法 1. 母液A（0.2mol/L的Na2HPO4溶液）：稱取Na2HPO4?12水143.256g， 用去離子水定容至2L。
2.
母液B（0.1mol/L的檸檬酸溶液）：稱取檸檬酸?1水42.028g 用去離子水溶解定容至2L。
3.
pH2.6、4.6、6.6的三種緩沖液如下表配制：
pH值 A（mL） B（mL）
2.6
109.0 891.0
4.6
467.5 532.5
6.6 727.5 272.5
4.
按上表混勻后，4℃保存。
6、20×SSC 緩沖液 □配制量 1L
（pH7.0）
□配置方法 1.準(zhǔn)確稱取175.2g氯化鈉。
2.準(zhǔn)確稱取88.2g檸檬酸鈉?2水。
3.溶解于800mL去離子水中。
4.加入數(shù)滴10mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0。
5.加去離子水定容至1L。
注意：按實(shí)驗(yàn)需要可分裝后高壓滅菌。
10×SSC、5×SSC、1×SSC可由20×SSC做相應(yīng)稀釋得到。
7、0.15mol/L氯化鈉-
□組份濃度 0.15mol/L
乙二胺四乙酸二鈉 □配制量 1L
緩沖液 □配置方法 1.準(zhǔn)確稱取氯化鈉8.77g。
（pH8.0） 2.
稱取乙二胺四乙酸二鈉37.2g。
3.
溶于800mL去離子水中。
4.用固體的氫氧化鈉調(diào)pH值為8.0。
5.加去離子水定容至1L。
8、1/15mol/L的磷酸鹽
□組份濃度 0.15mol/L
緩沖液 □配制量 1L
（pH7.6）
□配置方法
1.溶液甲（1/15mol/L的KH2PO4溶液）：稱取KH2PO4 9.078g，用去離子水溶解定容至1L。
2. 溶液乙(1/15mol/L的Na2HPO4溶液):稱取Na2HPO4? 2水11.876g（或磷酸氫二鈉?12水23.894g）用去離子水溶解定容至1L。
3.pH7.6磷酸鹽緩沖液：將①和②按1.4：8.6比例混合即可。
9、5×Tris-GlycineBuffer □組份濃度0.125MTris，1.25MGlycine，0.5％（w/v）SDS
（SDS-PAGE電泳緩沖液） □配制量 1L
□配置方法 1.稱取下列試劑，置于1L燒杯中。
Tris 15.1g
Glycine 94g
SDS 5.0g
2.加入約800mL的去離子水，攪拌溶解。
3.加去離子水將溶液定容至1L后，室溫保存。
10、5×SDS-PAGE □組份濃度250mMTris-HCl（pH6.8）
Loading Buffer 10％（W/V） SDS
0.5％（W/V） BPB
50％（V/V） 甘油
5％（W/V） β-巰基乙醇
□配制量
5mL
□配置方法 1.量取下列試劑，置于10mL塑料離心管中。
1MTris-HCl 1.25mL
SDS0.5g
BPB 25mg
甘油 2.5mL
2.加入去離子水溶解后定容至5mL。
3.小份（500μl/份）分裝后，于室溫保存。
4.使用前將25μl的2-ME加到每小份中。
5.加入2-ME的Loading Buffer可在室溫下保存一個(gè)月左右
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