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組氨酸標(biāo)簽蛋白純化磁珠,His-tag蛋白純化的理想選擇

2018-2-5 20:11:04點(diǎn)擊:


蛋白質(zhì)表面的一些氨基酸,如組氨酸、色氨酸、半胱氨酸等能與多種金屬離子(Ca2+、Mg2+、Ni2+、Co2+等)發(fā)生特殊的相互作用,這些作用包括配位結(jié)合、靜電吸附、共價(jià)鍵結(jié)合,其中以配位結(jié)合為主,而且這其中又以His-Tag標(biāo)簽成為蛋白純化的首選標(biāo)簽。在重組蛋白末端融合多個(gè)組氨酸成串的肽段,憑借其與二價(jià)金屬離子的螯合作用,從而利用親和作用純化蛋白。

傳統(tǒng)的His-Tag蛋白多利用金屬螯合親合層析柱進(jìn)行層析分離。磁性納米粒子作為一種新型的介質(zhì),利用其在磁場下可快速分離的特點(diǎn),通過在磁珠表面螯合Ni2+離子,進(jìn)而將其用于His-Tag蛋白的純化,具有速度快、容易放大、可自動化操作等諸多優(yōu)點(diǎn)。His-Tag蛋白通過磁性介質(zhì)進(jìn)行分離純化的一般流程是裂解、吸附、洗滌、洗脫四個(gè)步驟,即可獲得高純度的目標(biāo)蛋白。
對比傳統(tǒng)的過柱層析純化方式, His-tag Protein Purification磁珠通過磁性分離方式純化組氨酸標(biāo)簽蛋白,無需對粗蛋白樣品進(jìn)行多次費(fèi)時(shí)費(fèi)力的離心、過濾步驟,無需裝柱和過柱層析,無需昂貴的柱層析設(shè)備,在1小時(shí)內(nèi)便能便捷地獲得高產(chǎn)量和高純度的目的蛋白,且能輕松實(shí)現(xiàn)多樣品平行處理,顯著提高了工作效率,大大降低了設(shè)備、時(shí)間和人工成本。

普睿邁格生物科技有限公司,通過獨(dú)有的技術(shù)開發(fā)了一系列具備不同特性的PuriMag? Ni系列磁珠,基于硅基的超順磁性納米粒子,大大降低表面的非特異吸附,進(jìn)而通過不同螯合基團(tuán)修飾的鎳離子 (Ni2+),特異性地分離His-tag蛋白。 該磁珠專為攜帶組氨酸標(biāo)簽的異源表達(dá)蛋白純化所設(shè)計(jì),對于大腸桿菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和動物細(xì)胞表達(dá)的組氨酸標(biāo)簽蛋白,均有優(yōu)異的純化性能。

PuriMag提供三種不同螯合方式的硅基Ni磁珠,可根據(jù)您的需要,自主選擇最合適的分離磁珠,為您獲得高純度蛋白提供助力。

(1)IDA鎳磁珠——PuriMag Si-IDA-Ni
IDA 通過雙羧基螯合Ni,結(jié)構(gòu)較為簡單,結(jié)合容量較高,成本相對低廉,但表面的Ni容易被其它小分子破壞,重復(fù)利用效果相對較差,但再生后重復(fù)利用較容易。

更多IDA鎳磁珠請參考產(chǎn)品頁: http://www.tools.7z1ocr.cn/Product/320781945.html
(2)NTA鎳磁珠——PuriMag Si -NTA-Ni
NTA螯合Ni磁珠是非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),Ni位于結(jié)構(gòu)的中心,可以保護(hù)競爭性小分子對Ni的進(jìn)攻,因此結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定,可以耐受一定濃度還原劑、變性劑、去污劑等各種小分子對Ni的影響。

更多NTA鎳磁珠請參考產(chǎn)品頁: http://www.tools.7z1ocr.cn/Product/1786041317.html
(3)TED鎳磁珠——PuriMag Si -TED-Ni 
TED螯合Ni磁珠是另外一種較非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),Ni位于結(jié)構(gòu)的中心,可以保護(hù)競爭性小分子對Ni的進(jìn)攻,因此結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定,能更好的耐受還原劑、變性劑、去污劑等各種小分子對Ni的影響。

更多TED鎳磁珠請參考產(chǎn)品頁: http://www.tools.7z1ocr.cn/Product/1953281313.html



圖1 磁珠法快速純化組氨酸標(biāo)簽蛋白流程